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CDD Ingénieur, niveau AI-IE, équipe PY

Réponse immunitaire antibactérienne chez la souris

Ingénieur, Poste niveau AI-IE

Centre International de Recherche en Infectiologie (INSERM U1111, CNRS UMR 5308, ENS Lyon, UCBL), Lyon

Equipe Inflammasome NLRP3 et réponse au sepsis, Bénédicte Py
Mission principale : Etude de la réponse immunitaire antibactérienne chez la souris (KO et traitées avec protéine recombinante)
Mission secondaire : Participation à la vie pratique et scientifique de l'équipe et du centre

Activités :
1. Expérimentation
- Analyse phénotypique in vivo de l'inflammation spontanée et/ou induite (choc endotoxique, infection bactérienne, ligature et ponction cecale (CLP): observation des souris, mise à mort, prélèvement de sang et d'organes, analyse en qRT-PCR, ELISA, luminex, FACS, CYTOF, WB)
- Génotypage des souris par PCR                                                                      - Production de protéine recombinante en 293T (culture cellulaire, transfection, purification sur colonne)                                                                - Analyse sur cellule ex vivo (prélèvement/différentiation/culture de macrophages et autres cellules primaires, ELISA, FACS, WB, co-immunoprécipitaion)

2. Gestion
- Gestion des colonies de souris (maintient d'une base de données des souris, répartition des souris entre différents utilisateurs, supervision des accouplements réalisés par les animaliers)
- Gestion et suivi des commandes et stocks du laboratoire
- Administration
- Participation à l'écriture et soumission des protocoles expérimentations auprès du comité d'éthique et du ministère
- Suivi des agréments (protocole, animalerie, fournisseurs, transport, utilisation de produits pharmacologiques,...)
- Participation à la vie pratique et scientifique de l'équipe et du centre
- Supervision et participation aux tâches communes de l’équipe
- Présentation des résultats en réunion d'équipe, de projet et séminaire

Compétences requises :
- Manipulation de souris (contention, injections sous-cutanée, intrapéritonéale, intraveineuse et intranasale)
- Sacrifice des souris par dissociation cervicale
- Prélèvement sanguin sur souris (veine caudale, sinus retro-orbital, sinus maxillaire, ponction intracardiaque)
- Prélèvement d'organe
- Test ELISA, éventuellement multiplex
- Marquage et analyse FACS, éventuellement CYTOF
- Extraction d'ARN à partir d'organe et analyse par qRT-PCR
- Extraction de protéines à partir d'organe et analyse par Western-blot
- Extraction d'ADN génomique et génotypage par PCR
- Biologie cellulaire (utilisation d'un PSM et travail en condition stérile L2 stricte, entretien de lignée (HEK 293, RAW, U937, THP1), extraction et culture de cellules primaires (macrophages murins)
- Niveau anglais intermédiaire (langue de travail dans l'équipe)
- Utilisation de Microsoft Excel, Word, Prism, PowerPoint
- Mise en forme et communication des résultats (présentation en labmeeting, et séminaire d'institut)

Compétences complémentaires :
- Manipulation d'agents infectieux (bactéries pathogènes) en environnement confiné (L2 strict, L3)
- Chirurgie de la souris (modèle de sepsis « ligature et ponction cecale »)
- Biologie moléculaire (clonage, mutagenèse dirigée, digestion enzymatique, ligation, transformation de bactéries, préparation d'ADN par miniprep et maxiprep)

Savoir-être requis :
- grande rigueur, fiabilité
- grand sens de l'organisation, autonomie
- flexibilité dans les horaires (suivi de souris)
- ténacité
- sens du service et esprit d'équipe
- auto-motivation dans le travail bien fait
- respect des consignes et adaptation à l'organisation pré-établie de l'équipe
Savoir-être complémentaire
- intégration dans la vie sociale de l'équipe
- dynamisme

Niveau de diplôme requis :
AI-IE: Bac+3 à Bac+5 (Master 2) selon expérience professionnelle complémentaire

Expérience professionnelle souhaitée :
2 ans d'expérience professionnelle cumulée dans la recherche

Contrat proposé :
CDD 1 an renouvelable (financé par ANR pour un total de 3 ans), employeur ENS de Lyon

Début de contrat souhaité entre Sept-Dec 2021, possibilté de flexibilté

Contact: Bénédicte Py : Benedicte.py@inserm.fr

Condition d'application :
- CV (détaillant les techniques maitrisées), lettre de motivation
- coordonnées de deux personnes référentes